ELISA試劑盒SCI文章實驗中的封閉液小知識
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
1、ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數(shù)選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結(jié)合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結(jié)合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結(jié)合抗體或抗原的時候就不會產(chǎn)生非特異結(jié)合了,不會影響實驗的準確度。
tween的作用:雖然不能單獨封閉,但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結(jié)合或結(jié)合不牢固的蛋白的作用,假如抗體包被在板上會出現(xiàn)YY-
附件:ELISA試劑盒實驗中緩沖溶液等試劑的配置
為了保證ELISA試劑盒SCI文章實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔,嚴防交叉污染。
Meprednisone 200mg 甲潑尼松標準品 1247-42-3
Biperiden Hydrochloride 200mg 鹽酸比哌立登標準品 1235-82-1
Methdilazine Hydrochloride 200mg 鹽酸甲吡吩嗪標準品 1229-35-2
Protriptyline Hydrochloride 200mg 鹽酸普羅替林標準品 1225-55-4
Ipodate Sodium 200mg 碘泊酸鈉標準品 1221-56-3
Sulfadimethoxine 200mg 磺胺二甲氧嗪標準品 122-11-2
Gemcitabine Hydrochloride 200mg 鹽酸吉西他濱標準品 122111-03-9
Loracarbef 200mg 氯碳頭孢標準品 121961-22-6
Propyl Gallate 200mg 沒食子酸丙酯標準品 121-79-9
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