人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒實驗分析
實驗方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
人血栓調(diào)節(jié)蛋白TM檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
樣品類型(SAMPLE TYPES):標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。
樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮?,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
人血栓調(diào)節(jié)蛋白TM注意事項:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在 4 ℃ 備用,如有特殊 原因需要周期收集標本,
將標本及時分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時, -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度可保存 6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
液體類標本
標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清或血漿。每個標本量收集體積= 100ul × 檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。
血清:人血栓調(diào)節(jié)蛋白TM室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
血漿:應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS ,緩沖液中可入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。