染色結(jié)果的觀察

1、陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)定位在細(xì)胞相應(yīng)的部位，在細(xì)胞膜表達(dá)的抗原陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)定位在細(xì)胞膜上，在其他部位的陽(yáng)性反應(yīng)均為非特異性染色。不當(dāng)?shù)目乖迯?fù)會(huì)導(dǎo)致抗原在組織細(xì)胞中定位的改變。根據(jù)所檢測(cè)抗原的不同，抗原分別定位在：

（1）細(xì)胞膜：如LCA和CD3、CD20等；

（2）細(xì)胞質(zhì)：如Cytokeratin 、GFAP、S100 、CgA、AFP等；

（3）細(xì)胞核：如Ki-67、ER、PR、TTF-1、HPV-Ag、Cyclin D1、TDT等。

2、組織的周邊、氣泡、刀痕、皺折等部位往往呈現(xiàn)非特異性陽(yáng)性表達(dá)。

3、染色結(jié)果呈陰性并非都是抗原不表達(dá)，要考慮是否與組織中的抗原受到破壞有關(guān)。

4、組織切片背景深與下列因素有關(guān)：

（1）石蠟切片脫蠟不干凈；

（2）*抗體濃度過(guò)高或孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，溫度過(guò)高；

（3）顯色劑DAB濃度過(guò)高或H2O2太多；細(xì)胞

（4）抗體不純；

（5）抗體孵育后切片清洗不干凈。