鉤狀螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒說明書

本產(chǎn)品是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。?

1. 方便，用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷，操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化，能減少污染，降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料，PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高，特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆，不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果：將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板，引物和水共15 μL 混合后，直接進(jìn)行PCR反應(yīng)（PCR 參數(shù)由用戶自己確定），反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。

以下是鉤狀螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒說明書的產(chǎn)品介紹：

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
支原體肉湯培養(yǎng)基(不含瓊脂和酚紅)250g用于支原體的增菌培養(yǎng)

膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 250(g) incubation media 膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 250(g)

煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB 250g 用于多管發(fā)酵法測(cè)定大腸菌群的確證試驗(yàn)(GB 4789.3-2010和SN0169-92)。

沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)SalmonellaShigellaAgar用于沙門氏菌，志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

ClostridiumPerfringensAssayMedium
堿性瓊脂25040250g用于霍亂弧菌及其它弧菌的培養(yǎng)。

NZYM Broth 培養(yǎng)基 100g incubation media NZYM Broth 培養(yǎng)基 100g

陰溝腸桿菌 食用 支/瓶

CAYEMedium

胰膘肉湯基礎(chǔ) 100g 用于肺炎鏈球菌、布魯氏菌屬細(xì)菌的培養(yǎng)
無菌雞血清  Sterile Defidrinated Chicken Blood  100毫升  BR

無菌豬血清  Sterile Defidrinated Pig Blood  100毫升  BR

無菌兔血清  Sterile Defidrinated Rabbit Blood  100毫升  BR

無菌小鼠血清  Sterile Defidrinated Mouse Blood  100毫升  BR
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我公司即用型PCR試劑盒：
運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸、-20℃保存，有效期一年。