亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒

亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義

硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶，廣泛存在于微生物及植物體內(nèi)，是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶，可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3，從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累，降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。

測(cè)定原理

亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。

需自備的儀器和用品

天平、研缽、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機(jī)。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。

神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白1ELISA試劑盒 NINJ1免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)絲束蛋白ELISA試劑盒 NPTN免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)束蛋白ELISA試劑盒 NFASC免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1ELISA試劑盒 NET1免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)連接蛋白3ELISA試劑盒 NLGN3免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)連接蛋白2ELISA試劑盒 NLGN2免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)連接蛋白1ELISA試劑盒 NLGN1免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)介素NELISA試劑盒 NMN免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)膠質(zhì)蛋白ELISA試劑盒 GLDN免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)降壓素受體2ELISA試劑盒 NTSR2免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)激肽AELISA試劑盒 NKA免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)鈣黏蛋白ELISA試劑盒 CDH2免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)鈣蛋白δELISA試劑盒 NCALδ免費(fèi)代測(cè)試劑

神經(jīng)氨酶ELISA試劑盒 NEU免費(fèi)代測(cè)試劑

伸展蛋白ELISA試劑盒 SNPH免費(fèi)代測(cè)試劑
亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒原果膠比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣

原果膠比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣

半乳糖醛比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

半乳糖醛比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

果膠甲酯化程度比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

果膠甲酯化程度比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

果膠酶比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣

果膠酶比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣

果膠裂解酶比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。